麥儀科學(xué)小課堂之液相色譜儀的使用方法

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本期知識(shí)點(diǎn):液相色譜儀的使用方法

液相色譜儀的使用方法


一、準(zhǔn)備工作

檢查設(shè)備:

確認(rèn)液相色譜儀的主機(jī)、注射器、柱箱、檢測(cè)器等設(shè)備是否正常工作,如有損壞或故障需及時(shí)修理或更換。

檢查和清潔儀器以確保其正常運(yùn)行。

檢查并校準(zhǔn)流量計(jì),以確保它們讀數(shù)準(zhǔn)確。


準(zhǔn)備試劑和樣品:

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求準(zhǔn)備好所需的溶劑、標(biāo)準(zhǔn)樣品和樣品。

確保試劑的質(zhì)量,例如流動(dòng)相必須使用HPLC級(jí)的試劑,并在使用前過(guò)濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)。


二、設(shè)置儀器參數(shù)

開(kāi)機(jī)并設(shè)置溫度和流速:

打開(kāi)色譜儀電源,并等待主機(jī)啟動(dòng)。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,設(shè)置適當(dāng)?shù)臏囟群土魉佟?/span>


設(shè)置檢測(cè)器:

選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方式,如紫外線檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等。

根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)或檢測(cè)器。


三、校準(zhǔn)系統(tǒng)

系統(tǒng)校準(zhǔn):

使用標(biāo)準(zhǔn)品或混合物進(jìn)行系統(tǒng)校準(zhǔn),以確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

執(zhí)行系統(tǒng)檢漏,確保系統(tǒng)沒(méi)有泄漏。


質(zhì)量控制:

進(jìn)行系統(tǒng)的質(zhì)量控制,以確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。


四、準(zhǔn)備樣品

樣品預(yù)處理:

將樣品溶解于適當(dāng)?shù)娜軇┲?,并過(guò)濾以去除雜質(zhì)。

根據(jù)需要進(jìn)行樣品的預(yù)處理,如固相萃取、離子交換或凝膠過(guò)濾等。


樣品進(jìn)樣:

使用注射器將準(zhǔn)備好的樣品注入到色譜柱中。

設(shè)置適當(dāng)?shù)淖⑸淞亢土魉?,保證分離效果。


五、運(yùn)行色譜儀

調(diào)節(jié)檢測(cè)器參數(shù):

調(diào)節(jié)檢測(cè)器的參數(shù),如波長(zhǎng)、靈敏度等,以優(yōu)化檢測(cè)效果。


開(kāi)始運(yùn)行實(shí)驗(yàn):

啟動(dòng)液相色譜儀并開(kāi)始運(yùn)行實(shí)驗(yàn)。

觀察實(shí)時(shí)色譜圖,根據(jù)需要調(diào)整柱溫、流速等參數(shù)以優(yōu)化分離效果。


六、數(shù)據(jù)分析和結(jié)果評(píng)估

數(shù)據(jù)處理:

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的數(shù)據(jù)處理方法,如峰面積計(jì)算、峰高計(jì)算等。

確保數(shù)據(jù)記錄和分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,并保存數(shù)據(jù)以備后續(xù)使用。


結(jié)果評(píng)估:

分析和解釋色譜圖以確定化合物的保留時(shí)間和峰形。

根據(jù)峰的面積計(jì)算化合物的濃度或相對(duì)含量。


七、清洗和維護(hù)

清洗:

在使用完畢后,及時(shí)清洗儀器以防止殘留物的積累。

對(duì)于不同的試劑和樣品,可能需要特定的清洗步驟和注意事項(xiàng)。


維護(hù):

定期對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng),包括更換柱和消耗品等。

注意儀器的存放環(huán)境,避免過(guò)度潮濕或暴露于高溫環(huán)境。

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